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默克高質量培養基如何操作

時間·↟↟••:2022-07-22 瀏覽次數·↟↟••:68

  高質量培養基是透過將培養基的各個成分混合研磨成糊狀☁╃,然後透過*的造粒工藝和Z後脫水製成的╃•▩✘。顆粒培養基為實驗室安全和產品質量帶來許多好處╃•▩✘。顆粒培養基優點明顯·↟↟••:1☁·、能顯著減少培養基的飛塵☁╃,減少有毒成分的吸入☁╃,使用更安全╃•▩✘。2☁·、可減少操作者的過敏反應╃•▩✘。3☁·、可減少粉塵對實驗室儀器☁·、裝置和衣服的汙染╃•▩✘。4☁·、更容易稱量╃•▩✘。5☁·、溶解速度快☁╃,不結塊╃•▩✘。6☁·、可以延長保質期╃•▩✘。7☁·、安全☁╃,減少有毒有害成分的吸入和汙染╃•▩✘。8☁·、防止元件分離和結塊╃•▩✘。9☁·、成分分佈均勻穩定☁╃,重現性好╃•▩✘。10☁·、稱量方便☁╃,流動性好☁╃,防止粘壁╃•▩✘。11☁·、快速均勻地溶解在水中╃•▩✘。 

高質量培養基

  高質量培養基實驗操作步驟·↟↟••:
  1☁·、基質膠包被的培養板·↟↟••:取出6孔板/12孔板☁╃,並加入1mL/0.5mL即用型基質膠(AC-1001007)移至每個孔☁╃,輕輕搖動6孔板/12孔板☁╃,使Matrigel完全覆蓋培養皿的底部╃•▩✘。將其置於37℃的恆溫箱中☁╃,保溫1h〜2h╃•▩✘。實驗前將其取出☁╃,並放在乾淨的工作臺/生物安全櫃中以在室溫下平衡╃•▩✘。20分鐘如果暫時不使用☁╃,可以用Parafilm密封並在2-8°C下儲存並在1周內使用╃•▩✘。
  注意·↟↟••:①冷凍的幹細胞數量約為1×106細胞/mL☁╃,相當於6孔板中的1個孔;②即用型基質膠對溫度敏感☁╃,因此請在使用後立即拿走☁╃,並在使用後立即放回原處╃•▩✘。儲存在4°C的冰箱中☁╃,不要接觸Matrigel液麵的瓶體直接接觸☁╃,將影響基質膠的質量╃•▩✘。
  2☁·、首先將2〜3mL幹細胞培養基新增到15mL離心管中☁╃,以備後用╃•▩✘。
  3☁·、解凍·↟↟••:將從液氮中取出的冷凍儲存管快速浸入37℃的溫水中☁╃,並迅速搖動使其在1〜2min內解凍;注意·↟↟••:應迅速從液氮中取出電池☁╃,以儘量減少其暴露於室溫的時間╃•▩✘。
  4☁·、離心·↟↟••:將凍存管中的凍存溶液解凍後☁╃,滴加到裝有幹細胞培養基的15mL離心管中╃•▩✘。將15mL離心管放入低速離心機中☁╃,然後以1200rpm離心╃•▩✘。3分鐘;
  5☁·、重懸·↟↟••:離心後☁╃,棄去上清液☁╃,加入1mL人多能幹細胞培養基移液☁╃,吸乾細胞沉澱約3至5次╃•▩✘。
  6☁·、接種·↟↟••:均勻吹吸後☁╃,丟棄已平衡的即用型基質膠☁╃,將均勻吹乾的幹細胞懸液加入包被的6孔板中☁╃,並在每個孔中填充2mL訓練系統╃•▩✘。
  7☁·、高質量培養基培養·↟↟••:可將接種的6孔板置於倒置相差顯微鏡下☁╃,觀察接種的幹細胞的密度和細胞團的大小╃•▩✘。超過4個細胞的團塊更合格╃•▩✘。水平的十字架很輕╃•▩✘。搖動6孔板/12孔板以均勻分佈細胞╃•▩✘。在37°C和5%CO2的恆溫培養箱中孵育╃•▩✘。第二天觀察細胞的粘附;

  8☁·、更換培養基·↟↟••:從復甦開始每隔24小時更換一次培養基╃•▩✘。


 高質量培養基是用於人類多能幹細胞的培養基☁╃,它沒有外來動物成分☁╃,化學成分清晰☁╃,並且適合無滋養細胞培養╃•▩✘。該產品適用於系統中培養的幹細胞☁╃,可用於幹細胞傳代╃•▩✘。它含有防止細胞凋亡和分化的幹細胞保護因子☁╃,並對細胞具有良好的保護作用╃•▩✘。
  1☁·、不需要滋養細胞╃•▩✘。
  2☁·、成分清晰☁╃,批次之間的差異很小╃•▩✘。
  3☁·、適用於在Essential8系統中培養的人多能幹細胞╃•▩✘。
  4☁·、不含外來動物成分☁╃,大大降低了各種病毒☁╃,黴菌和支原體汙染的風險╃•▩✘。


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